高效液相色譜儀是應(yīng)用高效液相色譜原理，主要用于分析高沸點(diǎn)不易揮發(fā)的、受熱不穩(wěn)定的和分子量大的有機(jī)化合物的儀器設(shè)備。它是由儲液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。目前可廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、食品科學(xué)、藥物研究以及環(huán)境研究中。下面我們就來了解一下高效液相色譜儀的操作方法！

 

　　高效液相色譜儀的操作步驟：

　　1、過濾流動相，根據(jù)需要選擇不同的濾膜（0.45um）。

　　2、對抽濾后的流動相進(jìn)行超聲脫氣10-20分鐘。

　　3、打開HPLC工作站，連接好流動相管道，連接檢測系統(tǒng)。

　　4、進(jìn)入HPLC控制界面主菜單，點(diǎn)擊manual，進(jìn)入手動菜單。

　　5、有一段時間沒用，或者換了新的流動相，需要先沖洗泵和進(jìn)樣閥。沖洗泵，直接在泵的出水口，用針頭抽取。沖洗進(jìn)樣閥，需要在manual菜單下，先點(diǎn)擊purge，再點(diǎn)擊start，沖洗時速度不要超過10 ml/min。

　　6、調(diào)節(jié)流量，初次使用新的流動相，可以先試一下壓力，流速越大，壓力越大，一般不要超過2000。點(diǎn)擊injure，選用合適的流速，點(diǎn)擊on，走基線，觀察基線的情況。

　　7、設(shè)計走樣方法。點(diǎn)擊file，選取select users and methods，可以選取現(xiàn)有的各種走樣方法。若需建立一個新的方法，點(diǎn)擊new method。選取需要的配件，包括進(jìn)樣閥，泵，檢測器等，根據(jù)需要而不同。選完后，點(diǎn)擊protocol。一個完整的走樣方法需要包括：

　　①、進(jìn)樣前的穩(wěn)流，一般2-5分鐘；

　　②、基線歸零；

　　③、進(jìn)樣閥的loading-inject轉(zhuǎn)換；

　　④、走樣時間，隨不同的樣品而不同。

　　8、進(jìn)樣和進(jìn)樣后操作。選定走樣方法，點(diǎn)擊start。進(jìn)樣，所有的樣品均需過濾。方法走完后，點(diǎn)擊postrun，可記錄數(shù)據(jù)和做標(biāo)記等。全部樣品走完后，再用上面的方法走一段基線，洗掉剩余物。

　　9、關(guān)機(jī)時，先關(guān)計算機(jī)，再關(guān)液相色譜。